生物化学-----蛋白质的分离与鉴定(专业科目农学类)

　　主要测查应试者对蛋白质分离、鉴定的常用方法、原理及应用特点，蛋白质四大层析技术，SDS-PAGE、凝胶过滤、亲和层析、免疫印迹等的理解及掌握程度。

　　第一节 蛋白质性质

　　一、蛋白质酸碱性质、溶解度、大小及形状蛋白质酸碱性的影响因素;蛋白质的相对分子量和形状;蛋白质按溶解度大小的分类。

　　二、蛋白质胶体性质

　　蛋白质的胶体性质;胶体溶液中的蛋白质具有稳定性的因素。

　　三、蛋白质免疫化学性质

　　抗原、抗体、半抗体、抗原决定簇的基本概念;抗体的基本特征。

　　第二节 蛋白质分离纯化

　　一、根据溶解度差异分离蛋白质

　　等电沉淀、盐析、盐溶的分离原理和应用特点;有机溶剂沉淀、蛋白质变性沉淀的分离原理和应用特点。

　　二、根据分子大小差异分离蛋白质

　　透析;超滤;密度梯度离心;凝胶过滤的分离原理和实验技术应用特点。

　　三、根据电荷不同分离蛋白质

　　PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)、等电聚集电泳、双向电泳的分离原理和实验技术应用特点;阳离子交换层析、阴离子交换层析的分离原理和应用特点。

　　四、根据蛋白质吸附特性分离蛋白质

　　吸附层析的定义;吸附层析的应用特点。

　　五、根据生物分子特异亲和力分离蛋白质亲和层析的定义;亲和层析的应用特点。

　　第三节 蛋白质鉴定

　　一、蛋白质分子质量鉴定

　　SDS-PAGE的原理与实验技术应用特点;SDS-PAGE中蛋白质分子质量与迁移率的关系式;凝胶过滤法中蛋白质分子质量与洗脱剂体积的关系式;沉降速度法中蛋白质分子质量与沉降系数的关系式。

　　二、蛋白质免疫印迹分析

　　免疫印迹分析的概念;实验原理和应用特点。

　　三、蛋白质定量分析、蛋白质纯度测定

　　双缩脲反应;Folin-酚反应;考马斯亮蓝结合反应的反应原理;蛋白质纯度鉴定的主要方法。